PERBEDAAN PERTUMBUHAN BAKTERI Shigella dysentriae PADA BERBAGAI KONSENTRASI PERASAN KULIT APEL MANALAGI

Pendahuluan

Diare merupakan salah satu masalah kesehatan utama di negara berkembang, termasuk Indonesia. Salah satu penyebab utama diare bakterial adalah Shigella dysentriae, bakteri gram-negatif yang menyebabkan disentri basiler. Infeksi ini ditandai dengan demam, kejang perut, serta frekuensi buang air besar yang disertai lendir atau darah. Penggunaan antibiotik secara berlebihan dan tidak tepat telah menyebabkan munculnya resistensi bakteri terhadap obat-obatan, sehingga diperlukan alternatif pengobatan dari bahan alami yang lebih aman dan minim efek samping.

Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) merupakan varietas apel yang populer di Indonesia, khususnya di daerah Batu, Malang. Selain daging buahnya yang nikmat, kulit apel ternyata mengandung berbagai senyawa bioaktif yang bermanfaat. Kulit apel kaya akan flavonoid, fenolik, asam organik, dan triterpenoid. Beberapa penelitian sebelumnya menyatakan bahwa senyawa tersebut memiliki potensi sebagai antibakteri alami. Namun, pengujian spesifik mengenai pengaruh konsentrasi perasan kulit apel Manalagi terhadap bakteri Shigella dysentriae masih terbatas.

Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut, rumusan masalah dalam penelitian ini adalah: Apakah terdapat perbedaan pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae pada berbagai konsentrasi perasan kulit apel Manalagi?

Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui perbedaan zona hambat pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae dengan menggunakan perasan kulit apel Manalagi pada konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%.

Manfaat Penelitian

• Secara Teoretis: Menambah khazanah pengetahuan mengenai aktivitas antibakteri dari tanaman, khususnya kulit apel Manalagi terhadap bakteri patogen penyebab diare.
• Secara Praktis: Memberikan informasi kepada masyarakat mengenai potensi pemanfaatan limbah kulit apel sebagai alternatif bahan antimikroba alami.

Tinjauan Pustaka

1. Bakteri Shigella dysentriae

Shigella dysentriae adalah bakteri patogen yang masuk ke dalam golongan Enterobacteriaceae. Bakteri ini merupakan penyebab utama shigellosis (disentri basiler), suatu infeksi usus yang menular. Shigella memiliki kemampuan untuk menginvasi epitel usus halus, menyebabkan peradangan dan nekrosis jaringan. Gejala klinis yang ditimbulkan berkisar dari diare ringan hingga disentri yang berat dengan kotoran mengandung darah dan lendir. Pengendalian pertumbuhan bakteri ini menjadi krusial untuk mencegah penyebaran epidemi, terutama di daerah dengan sanitasi kurang baik.

2. Kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill)

Apel Manalagi adalah salah satu jenis apel yang banyak dikonsumsi masyarakat. Kulit buah ini seringkali dibuang dan menjadi limbah, padahal mengandung senyawa aktif dalam jumlah yang lebih tinggi dibandingkan daging buahnya. Kulit apel mengandung senyawa polifenol seperti quercetin, catechin, phloridzin, dan chlorogenic acid. Senyawa-senyawa ini berperan sebagai antioksidan dan antimikroba.

Mekanisme kerja senyawa antibakteri alami dari tanaman umumnya terjadi melalui gangguan pada dinding sel bakteri, kerusakan membran sel, hingga denaturasi protein intraseluler. Kandungan asam organik dalam kulit apel juga berkontribusi dalam menurunkan pH lingkungan sehingga bakteri sulit bertahan hidup.

Metode Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode eksperimen laboratoris. Desain penelitian yang diterapkan adalah Post Test Only Control Group Design, di mana pengukuran dilakukan setelah pemberian perlakuan tanpa pengukuran awal (pre-test).

Bahan dan Alat

• Bahan: Kulit apel Manalagi segar, kultur Shigella dysentriae murni, media Mueller Hinton Agar (MHA), alkohol 70%, aquades, dan disk kertas cakram.
• Alat: Autoclave, laminar air flow, inkubator, cawan petri, pinset, tabung reaksi, spatul, dan bunsen.

Prosedur Penelitian

1. Pembuatan Ekstrak: Kulit apel Manalagi dicuci bersih, dihaluskan (diblender), kemudian diperas untuk diambil sarinya. Ekstrak kemudian difilter untuk mendapatkan perasan murni yang dicampur dengan sedikit alkohol sebagai pengawet.
2. Sterilisasi: Media MHA dan alat-alat yang digunakan disterilkan menggunakan autoclave pada suhu 121C selama 15 menit.
3. Inokulasi Bakteri: Kultur Shigella dysentriae disebarkan secara merata pada permukaan media MHA di dalam cawan petri menggunakan teknik swab.
4. Pemberian Perlakuan: Disk kertas yang telah dicelupkan ke dalam perasan kulit apel dengan konsentrasi berbeda (20%, 40%, 60%, 80%, 100%) ditempatkan pada permukaan media yang telah diinokulasikan. Juga disiapkan kontrol positif (disk yang diberi antibiotik standar) dan kontrol negatif (disk yang diberi akuades).
5. Inkubasi: Cawan petri diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam.
6. Pengukuran: Setelah inkubasi, diameter zona bening (zona hambat) di sekitar disk kertas diukur menggunakan penggaris (dalam satuan milimeter/mm).

Hasil dan Pembahasan

Hasil Penelitian

Berdasarkan pengamatan yang dilakukan selama 24 jam, terjadi pembentukan zona hambat di sekitar disk kertas yang mengandung perasan kulit apel Manalagi. Data rata-rata diameter zona hambat pada setiap perlakuan disajikan pada tabel berikut:

Pembahasan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa perasan kulit apel Manalagi memiliki aktivitas antibakteri terhadap Shigella dysentriae. Hal ini dibuktikan dengan adanya zona bening di sekitar disk kertas yang mengindikasikan bahwa bakteri tidak dapat tumbuh pada area tersebut. Kontrol negatif tidak menunjukkan zona hambat, membuktikan bahwa media atau pelarut yang digunakan tidak memengaruhi pertumbuhan bakteri.

Terlihat adanya tren keterkaitan erat antara konsentrasi ekstrak dengan luas diameter zona hambat. Pada konsentrasi 20%, diameter zona hambat masih relatif kecil (lemah), namun pada konsentrasi 100%, diameter zona hambat mendekati kontrol positif (kuat). Fenomena ini sesuai dengan teori bahwa semakin tinggi konsentrasi zat aktif (misalnya flavonoid, tanin, saponin) yang kontak dengan bakteri, maka semakin luas area pertumbuhan yang dapat dihambat.

Senyawa flavonoid dalam kulit apel Manalagi diduga bekerja dengan cara menghambat sintesis DNA girase bakteri, enzim yang penting untuk replikasi DNA. Selain itu, asam organik seperti asam malat dan asam sitrat yang terkandung dalam apel dapat menurunkan pH lingkungan, sehingga memengaruhi aktivitas sistem pompa membran bakteri. Tanin juga dapat mengikat protein pada permukaan sel bakteri, menyebabkan kerusakan membran dan kebocoran komponen intraseluler yang vital.

Meskipun aktivitasnya belum melampaui kontrol positif (antibiotik standar seperti Kloramfenikol atau Ciprofloxacin), perasan konsentrasi tinggi (100%) menunjukkan potensi yang sangat besar. Ini membuka peluang bagi pengembangan herbal antidiare yang murah dan mudah diakses, mengingat limbah kulit apel cukup melimpah.